Pfu DNA Polymerase

 Pfu DNA Polymerase
目錄號(hào) 包裝 價(jià)格
PC1300-500 500U 180.00
PC1300-1000 1000U 320.00
產(chǎn)品簡介：本公司生產(chǎn)的Pfu DNA Ploymerase是從克隆有Pyrococcus
furiosis DNA Ploymerase基因的大腸桿菌中表達(dá)并經(jīng)過柱純化分離出
來的重組蛋白，其分子量為90kDa。由于Pfu酶具有3’→5’核酸外
切酶活性，它能糾正DNA擴(kuò)增過程中產(chǎn)生的錯(cuò)配，而傳統(tǒng)的Taq酶卻
不能，其它耐熱DNA Polymerase如Vent、Deep Vent、Tli、UITma等
雖具有校正功能，但Pfu酶是目前已發(fā)現(xiàn)的所有耐熱DNA Polymerase
中出錯(cuò)率低的。Pfu酶無5’→3’核酸外切酶活性，PCR反應(yīng)中的
延伸速度一般為0.5-1kb/分鐘，比Taq酶要低。Pfu 酶比Taq酶熱穩(wěn)定
性更好，95℃ 1小時(shí)仍保持90%以上的活性，對(duì)于GC含量很高的模
板，變性溫度可以提高到98℃而不影響其活性。Pfu酶的PCR產(chǎn)物為
平末端，可加A處理再與T-載體連接或使用平末端克隆載體。一般用
于DNA的高保真擴(kuò)增，如基因表達(dá)克隆、基因定點(diǎn)突變、細(xì)胞內(nèi)基
因點(diǎn)突變分析（SNP）和末端補(bǔ)平等。
活性定義：1單位（U） Pfu DNA Polymerase活力定義為在74℃，30
分鐘內(nèi)，以活性化的大馬哈魚精子DNA作為模板/引物，將10nmol
脫氧核苷酸摻入到酸不溶物質(zhì)所需的酶量。
質(zhì)量控制檢測(cè)：SDS-PAGE檢測(cè)純度大于
99%；經(jīng)檢測(cè)無外源核酸酶活性；PCR方法檢測(cè)無宿主殘余DNA；
能有效地?cái)U(kuò)增人類基因組中的單拷貝基因；室溫存放一周，無明顯
活性改變。
產(chǎn)品內(nèi)容：
酶儲(chǔ)存緩沖液 10×Pfu Buffer
50 mM Tris-HCl （pH 8.2） 200 mM Tris-HCl （pH 8.8）
0.1 mM EDTA 100 mM KCl
1 mM DTT 100 mM （NH4）2SO4
50% glycerol 20 mM MgSO4
Stabilizers 1%Triton X-100
其它
注意事項(xiàng)：
1、Pfu DNA Ploymerase應(yīng)儲(chǔ)存于-20℃，有效期12個(gè)月。
2、取Pfu DNA Ploymerase做PCR反應(yīng)時(shí)，請(qǐng)用高壓滅菌處理過的
吸頭。
3、用Pfu酶擴(kuò)增時(shí)，引物的純度要求較高，引物長度大于18個(gè)堿
基，Tm值在55-80℃之間，引物濃度在0.1-0.5uM之間，比Taq
酶略高。