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柱式法提取組織 RNA 試劑盒
貨號：R1240
規格：50T/100T
保存：室溫（15℃-25℃）干燥保存，有效期 1 年。
注意：使用前請先在洗滌液和漂洗液中加入無水乙醇，加入體積請參照瓶體上的標簽。
產品簡介：該試劑盒對經典的異硫氰酸胍抽提 RNA 的方法進行了改良。改良后的裂解液能迅速裂解細胞，釋放出 RNA 的同時滅活 RNase。RNA 在高離序鹽狀態下選擇性吸附于離心柱內硅基質膜上，再通過一系列漂洗和離心等步驟進一步將蛋白等雜質去除，最后用 RNase-Free ddH2O 將 RNA 從硅基質膜上洗脫。本試劑盒操作快速便捷，安全無需使用酚、氯仿等有毒試劑，操作安全。
操作步驟：
1、細胞裂解取 25mg 左右組織，每管加入 600ul 裂解液，小鋼珠破碎，冰浴放置 5min。
2、向吸附柱中加入混合液。4℃ 13000rpm 離心 3min，倒掉收集管中的廢液，將吸附柱重新放回收集管中。
3、向吸附柱中加入 600ul 洗滌液(使用前請先檢查是否已加入無水乙醇)，4℃13000rpm 離心 2min，倒掉收集管中的廢液，將吸附柱重新放回收集管中。
4、向吸附柱中加入 50ul Dnase 酶，靜置 10~15min。
5、向吸附柱中加入 600ul 漂洗液(使用前請先檢查是否已加入無水乙醇)。4℃13000rpm 離心 2min，倒掉收集管中的廢液，將吸附柱重新放回收集管中。
6、重復操作步驟 5。
7、4℃ 13000rpm 離心 2min，將吸附柱敞口室溫放置 3min，以除去多余的乙醇。
8、將吸附柱放到一個干凈的離心管上，向吸附柱中加入 30-100μL 洗脫液，室溫放置 2min，4℃，13000rpm 離心 1min，得到 RNA 溶液，RNA 保存于-80℃。
注意事項：
1、所有相關器皿耗材都應為 RNase-free 產品，操作過程要小心，帶口罩、手套避免環境中 RNA 酶污染樣品。
2、洗脫液的體積不應少于 30μL，體積過少會影響提取效率，RNA 產物應保存在-80℃，以防 RNA 降解。
3、RNA 濃度及純度檢測：提取的 RNA 片段可用瓊脂糖凝膠電泳和紫外分光光度計檢測濃度與純度。OD260/OD280 比值應為 2.0-2.2。
備注：25mg 小鼠肝組織樣品，用 50μL RNase-free ddH2O 洗脫。
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